DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表观。 DNA甲基化在维持细胞正常功能、传递基因组印记,胚胎发育、肿瘤发生等方面发挥重要...
目标序列捕获测序常见问题集锦
目标序列捕获测序,是将感兴趣的基因组区域定制成特异性探针与基因组DNA进行杂交(固相或液相),将目标基因组区域的DNA片段进行富集后再利用第二代测序技术进行测序。这种新的方法与PCR方法相比,通量高,...
ChIP-Seq分析常见问题集锦
染色质免疫共沉淀测序(ChIP-Seq)是指对染色质免疫共沉淀(ChIP)获得的DNA片段进行大规模测序,并能把所研究蛋白的DNA结合位点精确定位到基因组上。 Roche GS FLX Titaniu...
基因组组装常见问题集锦
基因组是如何组装的? 答:一般来说,针对以Illumina Gemone Analyzer测序结果为主的组装策略如下: (1)先利用短序列组装软件对paired-end数据进行de novo拼接,组装...
各种测序文库构建方式
目前3种测序技术 Roche 454,Solexa和ABI SOLID均有单端测序和双端测序两种方式。在基因组De Novo测序过程中,Roche 454的单端测序读长可以达到400 bp,经常用于基...
比较基因组分析的基本思路
比较基因组学是指在基因组图谱和序列分析的基础上,对已知基因和基因的结构进行比较,了解基因的功能,表达调控机制和物种进化过程的学科。一般包括以下几个方面的内容: (1) 和近缘物种进行成对基因组比对。可...
基因组注释分析主要包括哪些内容 ?
基因组注释包括以下方面的内容: (1) 重复序列的预测。通过比对已知的重复序列数据库,找出序列中包含的重复序列,识别类型并转化为N或者X,统计各种类型重复序列的分布。 (2) 编码基因的预测。通过将转...
如何利用重测序进行SNP分析?
利用新一代测序技术进行SNP分析,一般包括如下几步: (1) 测序结果的预处理,去除低质量的数据; (2) 利用短序列比对软件进行全基因组比对,找出多态性位点; (3) 根据一定规则来筛选可靠的SNP...
ChIP-Seq测序深度如何选择?
ChIP-seq分析过程中,随着测序深度加大,读长数目增多,分析得到的结合位点(‘峰’)的数目也随之增多,但会出现饱和,饱和以后,读长数目增加, ‘峰’的数目基本上不再改变。根据这个规律,为了确定测序...
荧光定量PCR
一.荧光PCR原理 1.荧光共振能量传递 (FRET) 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光,当另一屏蔽基团与其距离合适时,原发射光将会被屏蔽基团所吸收,并转化为其他波长的发射光或热能,称之...