目前发展成熟而被应用在许多研究的第二代测序技术中,被测序的library 大多为DNA而非RNA(测序原理请参照本部落格先前文章),在现有的mRNA-seq技术中,需先将RNA反转录为DNA,制备出D...
Strand Specific mRNA sequencing 之重要性与分析
研究生物基因转录体的方法有许多种,而使用次代定序仪系统进行转录体定序是目前相当热门的一种方式,科学家们使用 RNA-seq 分析转录体表现主要期望能够获得三种重要信息: 1. 了解整个转录体构造、sp...
Q-PCR(Real-time PCR)
实时聚合酶链锁反应(Real-time polymerase chain reaction,简称为Real-time PCR),又称定量实时聚合酶链锁反应(Quantitative real time...
不同长度mate-pair在组装上之差异
有时候会遇到使用者询问,为什么做不同长度的mate-pair呢? 这是因为contig间的距离不同,为了将这些不同距离的contig 组装起来,得到更完整的组装信息,所以才需要使用不同长度的mate-...
测序深度越深就能組出完整的genome么?
当我们在进行 de novo 测序时,一般而言,测序深度越深 (测序量越多)组装效果会越好,就如同统计学中所述,抽样的样本数越多,其分布会越接近母体之分布。 不过,是不是只要一直增加测序量就能完整组出...
GC rich的区域不易测序的原因
GC rich的区域不易测序的原因,主要发生于以下两个阶段: 1. PCR 阶段 由于GC rich的区域,其氢键数较多,稳定性较强,因此在PCR时,GC rich的区域较不易分开,因此不容易被扩增。...
芯片数据分析介绍
芯片分析概述 随着基因芯片技术的普及,基因表达数据大量产生,如何充分利用这些数据并从中提取有用的生物学知识,是生物信息学所面临的一个迫切问题。简要来说,生物芯片数据分析流程大体可分成以下几个阶段。 扫...
各种高通量测序仪比较
高通量测序技术发展的真是快啊,454最近发布的GS FLX Titanium XL+系统的测序长度已经可达700~1000bp了!!通量700M,运行时间23小时。资料请看这里。虽然454的通量有点低...
BLAST+的使用
BLAST+与BLAST相比,有很多改进和提高,NCBI强烈推荐放弃BLAST,使用BLAST+, 这里说的BLAST和BLAST+,都是本地的。BLAST下载地址:NCBI BLAST+ (ftp:...
用R读取Excel
还在纠结用如何用R读取Excel的同学有福了。昨天逛CRAN的时候发现了一个xlsx包,它给出的介绍是可以读取、写入Excel 2007/2003文件并支持格式的设置。简单地来说,将Excel读取为数...