基因表达标准化 不同样品的测序量会有差异,最简单的标准化方式是计算 counts per million (CPM),即原始reads count除以总reads数乘以1,000,000。 这种计算方...
使用DESeq2进行差异表达分析
下载完原始数据,比对以及构建DESeqDataSet对象等一系列使用前准备完成后,我们便可以使用DESeq2进行后续的差异表达分析了。由于DESeq2的原理和内部的处理方法非常复杂,因此本文暂时不涉及...
DESeq2使用前准备
DESeq2是比较常用的bulk RNA-seq分析软件,也可以处理类似的ChIP-Seq,shRNA以及质谱数据。DESeq2基于负二项分布的模型对count table进行数据处理,因此需要的输入...
别再用DEseq2和edgeR进行大样本差异表达基因分析了
读博那几年,闲着没事就喜欢做各种软件的测试对比。有时候几个转录组样本非得用两三个差异分析方法都做一遍。严谨起来就给它们之间求一个交集,狡猾起来就谁的结果「更好」就用谁(想必你也是这么做的)。 2021...
用DESeq2包来对RNA-seq数据进行差异分析
差异分析的套路都是差不多的,大部分设计思想都是继承limma这个包,DESeq2也不例外。 DESeq2是DESeq包的更新版本,看样子应该不会有DESeq3了,哈哈,它的设计思想就是针对count类...
简单使用DESeq2/EdgeR做差异分析
DESeq2和EdgeR都可用于做基因差异表达分析,主要也是用于RNA-Seq数据,同样也可以处理类似的ChIP-Seq,shRNA以及质谱数据。 这两个都属于R包,其相同点在于都是对count da...
从spike-in到DESeq2:文库normalization
最近在处理一批RNA-seq的数据,里面混入了spike-in。利用spike-in矫正之后,样本A的基因表达量普遍比样本B的基因表达量高3-5倍,这和我所熟知的背景知识是一致的。 但是当我使用DES...